嵌合抗原受体 T 细胞 (CAR-T) 疗法在血液系统恶性肿瘤治疗领域取得重要进展，传统 CAR-T 细胞疗法存在流程繁琐、成本偏高、普及难度大等问题，制约临床广泛应用。新一代 In vivo CAR-T 技术借助靶向递送系统，将 CAR 编码元件直接送入患者体内 T 细胞，完成体内基因编辑与细胞功能改造，革新 CAR-T 制备模式。该技术优化传统疗法现存短板，同时拓宽 CAR-T 在实体瘤、自身免疫病方向的应用空间。
图 1 传统 CAR-T (Ex vivo CAR-T) 与 In vivo CAR-T (In situ CAR-T) 生产模式对比
(图片来源：Int J Mol Sci. 2023 Oct 28;24 (21):15688.)
相较于传统 CAR-T 疗法，In vivo CAR-T 疗法借助 T 细胞趋向性慢病毒、CD8+T 细胞靶向 LNP 等递送载体，将 CAR 编码元件 (DNA/mRNA) 输送至患者自身 T 细胞内，经由载体转导、胞内释放，完成 CAR 转录翻译与细胞表面表达，实现 T 细胞功能改造；改造后的 CAR-T 细胞可识别肿瘤、病变细胞抗原，激活细胞杀伤作用，清除对应病变细胞。
该疗法简化体外采集、基因改造、细胞扩增、回输等多步骤流程，单次注射即可开展干预，缩短整体周期，降低对自体 T 细胞品质要求，适配更多人群，减少传统清淋预处理相关感染等相关问题。
目前，国内外多家企业开展 In vivo CAR-T 相关临床研究。在此背景下，药康生物可提供人源化免疫系统小鼠模型，配套搭建适配 In vivo CAR-T 的非临床药效评价体系，用于药效观测、体内基因编辑效率、CAR 表达水平检测，助力新药研发工作推进。
数据分享
人源 PBMC 重建 NCG-MHC-dKO 小鼠体内药效评价
实验流程：将 Nalm6-Luc 肿瘤细胞经尾静脉接种至 NCG-MHC-dKO 小鼠，腹腔注射 2×107 PBMC 后，腹腔给药抗 CD19-CAR 慢病毒载体 (图 2A)；采用流式检测人 T 细胞 CAR 表达情况，判断体内编辑效果 (图 2E)，活体成像观测小鼠肿瘤负荷变化 (图 2B)。
图 2 In vivo CAR-T 在 huPBMC-NCG-MHC-dKO 小鼠中的药效评价（合作验证数据）
如图 2 可见，该模型下 In vivo CAR-T 干预组可抑制 Nalm6-Luc 肿瘤增殖，延长实验动物存活时长；对照组无明显抑瘤作用，佐证受试制剂作用效果（图 2C、图 2D），且干预组可检出携带 CAR 的人源 T 细胞（图 2E）。
人源 HSC 重建 huHSC-NCG 小鼠体内药效评价
以 UB-VV100 载体（用于 B 细胞相关肿瘤研发的候选制剂，携带 CD19-CAR 编码序列）评价为例：该模型腹腔注射梯度剂量 UB-VV100 后，流式检测可见 B 细胞清除效果随给药剂量提升而增强（图 3B），CAR-T 细胞占比同步随载体剂量升高上升（图 3C）。该模型可用于评估 CAR-T 制剂靶向清除能力与体内动态变化规律，也可搭配 CDX、PDX 模型，开展非 B 细胞相关靶点的药效评估。
图 3 In vivo CAR-T 在 huHSC-NCG 小鼠中的药效评价
(图片来源：J Immunother Cancer. 2023 Mar;11 (3):e006292.)
In vivo CAR-T 技术推动细胞治疗模式调整，简化制备流程，是免疫治疗重要研究方向。该技术开展临床转化，需要临床前模型模拟人体环境，评估药物体内作用表现。
国内多家 CRO 机构可提供人源化小鼠模型相关研究支撑。药康生物搭建免疫系统人源化模型，可用于 In vivo CAR-T 药物作用效果、持续作用时长、安全性相关试验；同时可配套临床前药效相关全流程试验服务，覆盖模型供给、试验数据检测等环节，支撑 In vivo CAR-T 疗法研发转化。
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